Staphylococcus haemolyticus se yon bakteri koagulase-negatif Gram-pozitif ki trè komen nan lopital yo. Nan dènye ane yo, enfeksyon lopital-akeri te resevwa atansyon ogmante akòz pi gwo risk yo. Staphylococcus haemolyticus ka pli lwen lakòz enfeksyon po, menenjit, peritonit, e menm enfeksyon. Reta nan dyagnostik klinik ka mennen nan vin pi grav estati sante, tèlman rapid dyagnostik nan S. haemolyticus se kle nan tretman egzak.
Ekip rechèch la nan pwofesè Ji Tuo soti nan Depatman Laboratwa Santral la nan Lopital Dezyèm Pèp la nan Lianyungang, Lachin pibliye yon atik "yon deteksyon rapid ak vizyèl nan Staphylococcus emolyticus nan echantiyon klinik ak MIRA-LFS" nan jounal la "Analytica Chimica Acta", ak yon faktè enpak nan 6.2.
1.ReSearch Apèsi sou lekòl la
Nan etid sa a, yo te etabli yon metòd MIRA-LFS ki baze sou jèn MVAA pou detekte Staphylococcus haemolyticus. Multi-anzim izotèrmik rapid asid anplifikasyon asid teknoloji a te konbine avèk lateral koule tès koule LFS pou reyalize deteksyon patojèn rapid.
Eksperyans lan te fèt nan 37 degre, ak rezilta yo ta ka detekte nan lespas 9 minit. Sansiblite nan deteksyon te 0. 147CFU/reyaksyon.
Metòd deteksyon MIRA-LFS la apwopriye pou deteksyon pwen fiks de staphylococcus emolyticus nan echantiyon klinik yo, pou reyalize metòd POCT pou idantifye emolittikis staphylococcus, ki se yon gwo valè pou dyagnostik maladi rapid ak tretman nan zòn ki gen sèvis medikal ki pa bay sèvis.
Ekip rechèch la te itilize MIRA-LFS, qPCR ak metòd tradisyonèl kilti bakteri pou analize 95 echantiyon klinik o aza ak konfime aplikabilite nan klinik la.
2.Rechèt metòd
Dyagram nan schematic nan deteksyon MIRA-LFS yo montre pi wo a.
Rechèch la te itilize AMP-lavni ADN Biotech a izotèrmik twous anplifikasyon rapid (koloidal Gold Tès dezabiye kalite) ak nikleyik asid deteksyon tès.
Longè MVAA jèn la se 30-35 nukleotid, ak longè a pwodwi anplifikasyon se 100-350 Bp. Yo te fè yon total de 6 pè kandida prime. Te analiz MIRA fè lè l sèvi avèk gDNA nan estanda Staphylococcus emolyticus tansyon, prime kandida yo te tès depistaj, ak pwodwi anplifikasyon yo te parèt lè l sèvi avèk 2% agarose jèl elèktroforèz.
Lè sa a, konsepsyon sondaj la ki baze sou sekans lan Jadendanfan pi devan (pwolonje 16 bp bak). Fen a 5 'nan pwofonde a te make ak FITC ak fen a 3' te make ak C3 bloke. Sèvi ak THF pou ranplase 31 nukleotid la nan ankèt la. THF se 30 bp soti nan fen a 5 'ak 15 bp soti nan fen a 3'. Se fen a 5 'nan Jadendanfan an ranvèse chwazi ki make ak biotin.
Anplis, ekip rechèch la optimize kondisyon reyaksyon yo pou deteksyon MIRA-LFS nan Staphylococcus emolyticus. Tès nan 37 degre nan entèval nan 2 minit soti nan 4 a 12 minit. Rezilta yo ap parèt nan tan reyaksyon 8min ak liy tès la se vizib klèman. Anplis de sa, tès yo fèt nan entèval nan 5 degre nan 22-52 degre. 37-42 degre se tanperati ki pi apwopriye pou deteksyon MIRA-LFS. Se poutèt sa, tan an reyaksyon pi bon ak tanperati a nan metòd la Mira-LFS pou Staphylococcus emolyticus yo se 8 min ak 37 degre, respektivman. Ansanm ak rezilta final la ke yo te vizualiz pa LFS nan 1 minit, tan an deteksyon total se 9 minit.
3. Rezilta Eksperimental
Verifikasyon sansiblite
Mira-LFS épreuves te fèt sou konsantrasyon diferan nan ADN jenomik (gDNA) jwenn nan seri staphylococcus haemolyticus kilti (1 0^6-10^0 Cfu/ml).
Analiz retou annaryè inite probabilist te montre ke 95% LOD detèmine pa tès MIRA-LFS la te 0. 147 CFU/reyaksyon.
Verifikasyon espesifik
Pa analize 18 komen patojèn microbes tansyon ak 15 klinik staphylococcus haemolyticus tansyon, selectivite a nan deteksyon MIRA-LFS nan Staphylococcus haemolyticus te detèmine. Rezilta yo te montre ke tès la MIRA-LFS te negatif pou 18 lòt bakteri patojèn ak pozitif pou 15 verifye echantiyon klinik nan Staphylococcus emolyticus.
Deteksyon MIRA-LFS se trè selektif ak apwopriye pou tès depistaj nan Staphylococcus emolyticus.
Tès echantiyon aktyèl
Lopital Lianyungang Dezyèm Pèp la kolekte 95 echantiyon, ki gen ladan 35 echantiyon po ak tisi mou, 16 echantiyon pipi, 14 echantiyon krache ak 30 echantiyon san.
Rezilta yo te montre ke metòd deteksyon an te 100% ki konsistan avèk metòd QPCR la. Anplis de sa, konpare ak estanda an lò (GB/T4789. Rezilta sa yo pli lwen verifye posibilite teknik nan metòd sa a nan detekte Staphylococcus emolyticus nan echantiyon klinik yo.
Se metòd la MIRA-LFS itilize pou deteksyon rapid POCT nan Staphylococcus emolyticus. Li se efikas, egzat, senp, ak pri ki ba, epi li ede fè dyagnostik rapid ak desizyon tretman.
Aprann sou teknoloji Mira
Multi-anzim AMP-Future a izotèrmik rapid asid nikleyè anplifikasyon teknoloji anplifye asid nikleyik nan yon tanperati konstan nan 39 degre -42 degre, ak yon tan reyaksyon nan sèlman 5-20 minit. Anplis de sa, kondisyon laboratwa strik yo pa obligatwa, ak senaryo yo aplikasyon yo diversifiée: depatman laboratwa jeneral lopital, swen primè, tès lakay, jaden, elatriye.
Fòm pwodwi reyaktif yo divès: friz-seche poud, friz-seche microspheres, elatriye; Rezilta ekspozisyon yo divès: elèktroforèz jèl, koub fluoresans, bann tès lò koloidal, elatriye. Reyaktif la gen pèfòmans ki estab, se fasil yo opere, epi li se pratik pou depo ak transpò.
Avèk MIRA kòm teknoloji a platfòm debaz, li te devlope yon seri de pwodwi sipòte tankou "ultra-vit teknoloji asid lage nwayo", "doub-chanèl izotèrmik detektè fluoresans", "entegre konplètman otomatik sistèm deteksyon fèmen", "pwòp tèt ou-tès aparèy asid nwayo", elatriye kreye yon solisyon an jeneral pou deteksyon rapid deteksyon.